The optimum mobile phase condition for analysis of the six purine derivatives (caffeine, guanine, hypoxanthine, purine, theobromine, and theophylline) were determined by a HCI program. Reversed-phase HPLC system was used with the binary mobile phase, water and methanol. Three retention models (Snyder, Langmuir, and Binary polynomial) were considered to predict the retention factors. The elution profiles were calculated by the plate theory based on the binary polynomial retention model. From the final calculated results, the binary polynomial retention model showed the best agreements between the calculated and experimental data. In the isocratic mode, the optimum mobile phase composition of water/methanol is 93/7 (v/v). However, we used step-gradient mode to decrease the run-time (1st mobile phase : water/methanol = 93/7 (v/v), gradient time : 5 min, 2nd mobile phase : water/methanol = 75/25 (v/v)). The experimental and simulated profiles of above the two conditions show a good agreement.

본 연구에서는 HCI프로그램을 이용하여 여섯 가지 퓨린 유도체(caffeine, guanine, hypoxanthine, purine, theobromine, and theophylline)의 최적 분석 조건을 결정하였다. 이동상으로 물과 메탄올을 사용하는 역상 HPLC를 사용하였다. 체류모델로는 Snyder, Langmuir, Binary polynomial 중에서 체류인자를 가장 잘 예측한 Binary polynomial을 사용하였고 용출곡선을 계산 하기 위해서는 단 이론(plate theory)을 사용하였으며 모든 계산은 HCI 프로그램을 이용하여 계산하였다. 이동상의 조건은 일정용매조성법(isocratic mode)과 계단함수 구배용매조성법(step-gradient mode)을 이용하였다. 일정용매조성법에서 물과 메 탄올의 조성비가 93/7 (v/v)일 때 최적 분석조건을 얻을 수 있었다. 분석시간의 단축을 위하여 계단함수 구배용매조성법을 사용하여 이동상의 조성을 물/메탄올 93/7 (v/v)에서 5 min 후에 75/25 (v/v)로 변경하는 최적조건을 계산했다. 위의 두 조건 에서 실험을 수행하여 계산 용출 곡선과 실험값을 비교하였으며, 매우 잘 일치함을 보였다.