For a novel anti-diabetic drug raw material, B^30-homoserine insulin precursor in a batch fermentation was studied to obtain a maximal production of HTS-fused B^30-homoserine insulin precursor in the recombinant Escherichia coli cells. The cultivation medium for an optimal growth was found to be TS. The maximal production of insulin precursor was achieved when the gene expression was induced by 0.5 mM IPTG at the middle logarithmic growth phase, especially when the cell density reached to 3.7 ~4.0 of OD_600. The highest productivity of insulin precursor was obtained as much as 38.95 mg/L-h, after the gene induction for 2 h, the total insulin protein occupied more than 12.8% of total protein of the recombinant E. coli cells. The HTS-fused B^30-homoserine insulin precursor was recovered from a batch culture through the processes of cell harvest, collection of insoluble fraction after sonication, and purification by nickel affinity column chromatography. The finally isolated insulin precursor was 9.12 mg/L with a recovery yield of 17.5% of the expressed gene product.

회분식 발효 공정을 이용하여 HTS-융합 B^30-homoserine insulin precursor의 생산에 관한 연구를 수행하였다. HTS-융합 B^30-homoserine insulin precursor를 발효 생산하는데 이용할 수 있는 적절한 배지를 선정하기 위해 5 L 발효조 상에서 실험을 수행하였다. TS 배지의 경우 OD_600 값이 10.16으로 가장 높았으며, YT-G 배지, HD 배지, LB 배지에서는 각각 OD_600 값이 6.74, 5.02, 3.82로 TS 배지에서 배양한 경우보다 훨씬 낮게 나타났다. 성장기별 재조합 단백질 생산 양상을 고찰한 결과 TS 배지에서 배양액의 농도가 OD_600 값으로 3.7~4.0인 중기 대수성장기에서 0.5 mM의 IPTG로 유도한 다음 2 h 더 배양한 후의 재조합 단백질 생산량이 38.95 mg/L-h로 성장기별 총 단백질량에 대한 재조합 단백질량의 비와 생산성에서 가장 높게 나타났다. Ni^2+-affnity column chromatography로 분리 ·정제한 재조합 단백질은 9.12 mg/L이었고, 분리·정제 수율은 발현된 재조합 단백질량의 17.5%이었다.